news 2026/6/11 12:44:53

Cys-GM-CSF (17-31);CNAIQEARRLLNLSRD

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张小明

前端开发工程师

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文章封面图
Cys-GM-CSF (17-31);CNAIQEARRLLNLSRD

一、基础信息

  • 中文名称:半胱氨酸修饰粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子 (17-31) 片段
  • 英文名称:Cys-GM-CSF (17-31)
  • 三字母序列:Cys-Asn-Ala-Ile-Gln-Glu-Ala-Arg-Arg-Leu-Leu-Asn-Leu-Ser-Arg-Asp
  • 单字母序列CNAIQEARRLLNLSRD
  • 氨基酸数量:16 aa
  • 分子式:C76H134N28O25S
  • 分子量:1872.14
  • 结构修饰:线性多肽,N 端额外引入Cys(半胱氨酸),无 N 端乙酰、无 C 端酰胺、无环化结构;游离巯基可用于偶联载体蛋白、荧光标记、固相固定等实验操作。
  • 结构式

二、理化性质

  1. 紫外定量:无 Tyr、Phe、Trp 等芳香族氨基酸,280 nm 无紫外吸收,需采用 BCA、Lowry、茚三酮法或氨基酸分析法定量。
  2. 稳定性:N 端含Cys,巯基易氧化形成二硫键,全程需隔氧、低温保存;无光敏残基,常规避光即可。序列含多组 Arg、Leu,整体抗普通蛋白酶水解能力中等。
  3. 酸碱特性:含酸性残基 Glu、Asp,碱性残基多个 Arg,同时存在 Asn、Gln、Ser 极性残基,整体呈弱酸性;在 pH 6.5~7.5 生理缓冲液中稳定性最佳,适配 PBS、细胞培养液、免疫反应缓冲液。
  4. 溶解性:带电氨基酸与极性残基占比高,水溶性良好,纯水、中性缓冲液常温可完全溶解。
  5. 空间构象:游离状态以无规卷曲为主,片段保留 GM-CSF 天然功能表位空间结构;N 端 Cys 为柔性延伸,不影响原有肽段构象。

三、来源背景

该肽为粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)天然 17-31 位活性片段,人工在 N 端添加半胱氨酸。GM-CSF 是关键造血及免疫调控细胞因子,此区段为重要抗原表位与功能域,额外引入的 Cys 主要用于化学偶联,广泛应用于抗体制备、蛋白互作、免疫检测等实验。

四、生物学功能

  1. 保留 GM-CSF 抗原表位,可刺激机体产生特异性抗体,是制备 GM-CSF 多克隆 / 单克隆抗体的优质免疫原。
  2. 模拟天然 GM-CSF 局部结构,可结合相应受体,轻度参与造血细胞、巨噬细胞、树突状细胞的活化与增殖调控。
  3. N 端游离巯基可定向偶联 KLH、BSA 等载体蛋白,大幅提升免疫原性,也可用于荧光基团、生物素标记。
  4. 参与免疫信号调控,可诱导细胞因子分泌,辅助开展免疫活化相关机制研究。

五、科研应用

  1. 抗体制备:作为免疫原,制备抗 GM-CSF 特异性抗体,用于 ELISA、Western blot、免疫组化等实验。
  2. 抗原 - 抗体互作研究:验证抗体结合表位,开展表位图谱分析。
  3. 细胞因子功能研究:体外细胞实验,探究 GM-CSF 片段对免疫细胞、造血细胞的活化作用。
  4. 蛋白标记与固定:利用 N 端 Cys 的巯基反应活性,进行荧光、生物素标记或芯片固相固定。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:使用无菌 pH7.2 PBS 或超纯水,现配现用;全程尽量减少暴露在空气中,防止巯基氧化。
  2. 冻干粉:短期 1~3 个月密封 - 20 ℃避光隔氧保存;长期分装后 - 80 ℃充氮气储存。
  3. 工作液:单次小体积分装,严禁反复冻融;2~8 ℃条件下密封存放不超过 3 天,建议低温避光保存。
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