news 2026/3/3 15:38:25

AF594标记的Streptavidin,一种基于生物素-链霉亲和素体系的AF405荧光探针

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张小明

前端开发工程师

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AF594标记的Streptavidin,一种基于生物素-链霉亲和素体系的AF405荧光探针

【试剂简介】

英文名称:Streptavidin, AF594 conjugate,AF594 Streptavidin,AF594标记的Streptavidin,Alexa Fluor594 Streptavidin

中文名称:AF594标记的链霉亲和素,链霉亲和素偶联AF594,链霉亲和素,AF594偶联物

【链霉亲和素AF594偶联物的特性与应用】

链霉亲和素(Streptavidin)是一种来源于阿维丁链霉菌的蛋白质,对生物素(biotin)具有极高的亲和力与特异性。当链霉亲和素与荧光染料Alexa Fluor 594(AF594)共价结合后,形成的偶联物成为一种用于检测与定位的高特异性工具。以下从多个方面对其进行分析说明。

一、 结构与作用原理

链霉亲和素由四个相同的亚基组成,每个亚基均可结合一个生物素分子。其与生物素的结合具有解离常数极低、结合速度快且不易受pH值或温度变化影响的特点。AF594是一种磺化罗丹明衍生物,具有较高的荧光量子产度与光稳定性。通过化学偶联,AF594分子被共价连接到链霉亲和素蛋白上,形成稳定的复合物。该复合物保留了链霉亲和素对生物素的高亲和力,同时具备了AF594的荧光特性。

二、 光学特性

AF594的最大激发波长约为590纳米,最大发射波长约为617纳米,处于橙红色光谱区域。该染料的荧光强度较高,且对光照漂白具有相对较强的耐受性,适合需要较长时间观察的实验。由于激发波长与常见荧光染料如FITC或DAPI分离度较好,便于进行多色标记与同时检测。

三、 主要应用方向

检测分析:在基于生物素-链霉亲和素系统的检测体系中,该偶联物可用于检测已标记生物素的靶分子。例如,在固相分析中,通过生物素化的识别分子捕获目标物,再利用本偶联物进行荧光信号生成与读取。

显微成像:在荧光显微镜技术中,可用于对生物素标记的细胞结构或分子进行定位与可视化。其发射波长适合大多数常规荧光显微镜滤光片配置。

流式分析:在流式细胞术中,可用于检测细胞表面或内部经生物素标记的靶点,实现对特定细胞群的鉴定与分析。

印迹技术:在蛋白质或核酸印迹实验中,作为生物素标记探针的荧光检测试剂,提供一种化学发光法之外的替代性检测方案。

四、 使用注意事项

避光操作:荧光偶联物对光敏感,建议在操作和储存过程中尽量减少曝光。

优化浓度:实际使用中需通过实验确定最佳工作浓度,避免因浓度过高导致非特异性结合背景,或浓度过低导致信号不足。

缓冲液兼容性:链霉亲和素在较宽的pH和离子强度范围内保持活性,但应避免含有游离生物素或变性剂的缓冲体系。

样品准备:待测样品中的靶分子需已有效标记生物素,且生物素化步骤不应显著影响识别分子的结合能力。

五、 与其他方法的比较

与酶标链霉亲和素相比,荧光偶联物无需底物孵育步骤,操作更为简便,且适用于动态或快速检测。与其他荧光链霉亲和素偶联物(如FITC、Cy3)相比,AF594的光稳定性通常优于许多传统染料,且其发射光谱与生物样本的自发荧光重叠较少,有助于提高信噪比。

【相关试剂】

Streptavidin, AF555 conjugate;AF555-链霉亲和素偶联物

355115-41-2;Dansylamidoethyl Methanethiosulfonate

HRP WGA;辣根过氧化物酶标记小麦胚芽凝集素

Biotin-diSulfo-Cyanine3 Tyramide;生物素-双磺酸-花菁染料CY3-酪胺

Biotin WGA;生物素标记小麦胚芽凝集素

CF640R WGA;CF640R Wheat germ agglutinin

Alexa Fluor 647 Wheat germ agglutinin

AF 647 标记小麦胚芽凝集素

Streptavidin, Alexa Fluor532 conjugate;Alexa Fluor532 链霉亲和素偶联物

Alexa Fluor 430 Wheat germ agglutinin;AF 430 标记小麦胚芽凝集素

Cal-520-Biocytin Conjugate;钙离子荧光探针Cal520生物胞素偶联物

Streptavidin, CF680R conjugate;CF680R-Streptavidin;链霉亲和素, CF680R偶联物

Biotin-PSMA;生物素-PSMA

iFluor 647 酪胺(iFluor 647 Styramide) * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*

【注意事项】

1.产品仅限用于科研实验,不用于临床和诊疗。

2.在使用过程中,也需要避免频繁解冻,保持干燥、避光和避氧气。

文章编辑来源:WWH

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