产品概述
本产品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的针对人源BRD9蛋白（Bromodomain Containing 9）的兔多克隆抗体，货号A303-781A。抗体以未标记的完整IgG形式提供，适用于免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB）应用。该抗体经抗原亲和纯化，特异性识别BRD9蛋白C端区域（第547-597位氨基酸残基之间的表位），可用于检测人源细胞中BRD9的表达水平、染色质重塑复合物组分分析及同源重组相关研究。
核心参数
参数 详细信息
靶标 BRD9
反应种属 人
宿主 兔
克隆性 多克隆
形式 完整IgG
免疫原区域 第547位至C端（具体为第547-597位氨基酸，参考序列NP_076413.3）
同型 IgG
偶联物 未偶联
纯度 抗原亲和纯化
浓度 1000 µg/ml
保存条件 2 8 °C
有效期 收货后1年
缓冲液 Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠
制备与纯化
本抗体采用固相固定化技术，使用特异性针对BRD9蛋白的表位进行亲和纯化。具体而言，识别表位定位于人源含溴结构域蛋白9（BRD9）的第547至597位氨基酸区域（基于GeneID 65980，序列编号NP_076413.3），该区域靠近蛋白C端。免疫球蛋白浓度通过比尔定律测定，设定1 mg/mL IgG在A280波长的吸光度为1.4。
应用与推荐稀释度
蛋白质印迹（Western Blot, WB）
推荐稀释度：1:2000 1:10,000
操作规范：
所有WB实验均使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液
一抗孵育条件：过夜孵育
细胞裂解液的WB检测：使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）
免疫沉淀物的WB检测：使用HRP标记的抗兔IgG轻链抗体，并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）
免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）
推荐用量：6 µg抗体 / mg裂解液蛋白
特异性与灵敏度
本抗体经亲和纯化，特异识别BRD9蛋白C端区域（第547-597位）。该表位远离N端的溴结构域，避免了与其它含溴结构域家族蛋白（如BRD2、BRD3、BRD4、BRD7等）的交叉反应，提高了检测的特异性。由于为多克隆抗体，可识别目标抗原上的多个表位，具有较高的检测灵敏度，适用于低丰度蛋白的检测。
工作浓度优势
WB推荐稀释范围宽（1:2000-1:10,000），便于用户根据样本表达量和检测体系进行灵活优化。IP推荐用量明确（6 µg/mg裂解液），降低了预实验摸索的工作量。
储存稳定性
在2-8°C条件下可稳定保存1年（自收货之日起）。缓冲液中含0.09%叠氮化钠作为防腐剂，注意叠氮化物会抑制过氧化物酶活性，若计划进行HRP偶联二抗检测，需在实验前通过透析或脱盐柱去除。
别名：
bromodomain-containing protein 9; LAVS3040; PRO9856; rhabdomyosarcoma antigen MU-RMS-40.8; sarcoma antigen NY-SAR-29
使用注意事项
1. 叠氮化物干扰：缓冲液中含有0.09%叠氮化钠。若下游实验使用HRP偶联二抗进行检测，需注意叠氮化物会抑制HRP活性。建议在进行WB或ELISA检测前，通过PBS透析或使用脱盐柱去除叠氮化物。
2. 抗体分装：虽然产品在2-8°C条件下稳定，但若需长期保存或避免反复取用，可考虑分装后保存于-20°C或-80°C。注意避免反复冻融，以免降低抗体活性。
3. 阳性对照建议：建议使用高表达BRD9的细胞系（如HeLa、HEK293、HCT116等）裂解液作为WB阳性对照。同时设置无抗体对照或同型对照用于IP实验，以排除非特异性结合。
4. 应用验证范围：本产品已在IP和WB应用中得到验证，但不保证在其他应用（如免疫荧光、免疫组化、ChIP等）中的效果。如需拓展应用（如ChIP-seq检测BRD9在染色质上的结合位点），建议自行进行预实验优化条件。
5. 实验参数优化：推荐的WB稀释范围和IP用量为起始参考值。对于特定的样本类型（如组织裂解液或核提取物），可能需要进一步优化抗体浓度、封闭条件和孵育时间。
